【皓元·技术】超临界流体色谱(SFC)和正相液相色谱(NPLC)在药物研发中的应用

2024-02-26 18:00:00
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超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography, SFC),是以超临界流体作为流动相的一种色谱技术,目前常用的超临界流体为CO2,并伴随改性剂来实现化合物分离纯化,如甲醇、乙醇、异丙醇等。


上海皓元医药股份有限公司(以下简称“皓元医药”)SFC正相分离纯化专业团队基于强大的化学和制备分离经验技术,依托国际一流的分析和制备超临界流体色谱仪等设备,为客户提供高效的制备分离方案。此外,皓元医药SFC分离纯化专业团队具备深厚的专业积累,有着丰富的实战经验。可满足毫克级到公斤级的拆分工作;服务样品类型多,涉及手性药物、小核酸、多肽、PROTAC、ADC类型及聚合物等系列样品的制备分离纯化。


目前,SFC已广泛应用于制药行业中药物类小分子的分离纯化,尤其适用于手性物质的分离,同时,在其他领域也有很多应用,如杂质、protec、多肽、天然产物等。


皓元医药SFC/正相实验室服务内容


 手性化合物分析分离方法进行开发和优化

 分离样品涵盖毫克级到公斤级

 非手性化合物分离纯化

 提供GMP或者GLP分离纯化需求


SFC在药物研发中的应用案例


01:手性分离


案例1:酸碱调节对于分离方法的优化--提高分离效果


项目背景:项目化合物在未调节酸碱前,分离效果不好甚至无法分离,如案例1-图2。


▲ 案例1-图1:分析方法图谱


▲ 案例1-图2:流动相酸碱调节前,制备分离图谱


优化后:通过对分离流动相的酸碱调节,改善和调节化合物在手性填料中的色谱行为,已获得最佳的制备分离效果。有时在化合物稳定的前提下,也会对分离粗品进行酸碱调节,从而实现更好的分离目的。如案例1-图3小量和放大量进样分离效果。


▲ 案例1-图3:流动相酸碱调节后,制备分离图谱


案例2:多手性化合物分离-提高效率,降低成本


项目背景:该项目如果按照粗品量,一遍分离获得全部四个峰的纯品,分离需要约12天;如案例2-图1,进样量很低且分离周期长。


▲ 案例2-图1:正相制备分离,小量单针分离图谱


优化后:改用调整后的分离策略分离周期仅需要1天;且回收率大于90%,最大程度提高了项目分离效率和减少了成本。如案例2-图2和案例2-图3。在分离收率和产品质量保障的基础上,合理采用分离策略会很大程度提高分离效率和控制成本。


▲ 案例2-图2:第一步增大进样量制备分离图谱

(获得PEAK1、PEAK2+PEAK3和PEAK4)


▲ 案例2-图3:第二遍制备分离图谱

(获得PEAK2和PEAK3)


02:非手性分离-杂质分离


案例分享3:不稳定化合物分离方法开发(工艺杂质研究)


项目背景:该项目是杂质分离的案例,一方面,反相分离杂质与另一个杂质的MS相同,且与其分离度不高;另一方面,杂质化合物在反相分离水体中稳定较差,采用反相分离很难获得目标杂质化合物。


优化后:采用SFC分离条件,很好的利用手性填料的特殊选择性差异,通过筛选并获得最优分离条件,同时,在无水条件下很好地提高了化合物的稳定性;最后,在连续进样和高压液相条件下,分离效率也大大地获得提升,并高效高质量获得目标杂质。如案例3-图1是优化后SFC分析方法开发条件。案例3-图2和案例3-图3是制备分离阶段的图谱。


▲ 案例3-图1:杂质化合物SFC分析图谱

(RT=2.8min为目标杂质产品)


▲ 案例3-图2:SFC制备分离单针进样图谱

(蓝色为目标杂质峰)


▲ 案例3-图3:SFC制备分离连续进样图谱

(褐色为目标杂质峰)


仪器设备


Waters Prep-SFC150Mgm


Waters Prep-SFC350 (GMP)


Waters UPCC


Shimadzu 20ADXR


YMC K-PrepLAB300G(GMP)


制备型色谱柱 20+种类